Tyramide Signal Amplification(TSA)は、酵素触媒作用を基本原理とするイン・シチュー検出法であり、従来の免疫蛍光法に内在する感度およびマルチプレックス化の限界を克服します。その核心となるメカニズムは、ホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)の高い触媒活性に依存しており、これにより標的タンパク質や核酸に対して特異的で高密度なラベリングを達成します。
ウェスタンブロット;溶解緩衝液;電気泳動関連試薬;SDS-PAGE
ウェスタンブロッティングは、複雑な混合物中の特定のタンパク質を検出するために広く用いられている免疫学的手法です。ゲル電気泳動の分離能と抗体の特異性を組み合わせた手法です。まず細胞または組織からタンパク質を抽出し、続いてSDS-PAGEを用いて分子量に基づいてタンパク質を分離します。次に、タンパク質を膜(通常はニトロセルロースまたはPVDF)に転写し、特異的抗体を用いて検出します。一次抗体は標的タンパク質に結合し、レポーター酵素を標識した二次抗体は、化学発光、蛍光、または比色検出によってタンパク質を可視化します。
ウェスタンブロッティング(免疫ブロッティングとも呼ばれる)は、タンパク質混合物(例えば細胞溶解物)中の個々のタンパク質を分析する技術です。ウェスタンブロッティング(免疫ブロッティング)では、タンパク質混合物をキャリアマトリックス(SDS-PAGE、ネイティブPAGE、等電点電気泳動、2Dゲル電気泳動など)中のゲル電気泳動にかけ、タンパク質をサイズ、電荷、あるいは個々のタンパク質バンドのその他の差異によって分類します。